高通量单细胞光导系统

高通量多组学单细胞广筛选
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高通量单细胞光导系统

芯片上的抗体发现实验室

现有抗体药物发现技术如杂交瘤及噬菌体/酵母展示虽应用广泛,但却存在诸多缺点。如制备周期长(4-6个月),杂交瘤细胞融合效率低(电转条件下仅能达到1/5000),不适合困难靶点(如GPCR蛋白)等。同时,噬菌体/酵母展示技术筛选过程中经常会导致抗 体VH/VL错配,从而增加了筛选工作量且需要繁琐的亲和力成熟处理。其他的单B细胞分选技术,因不能在分离单细胞的同时对其抗体表达、抗原结合及功能进行综合评估,存在单克隆性不佳、观测困难、通量低、可塑性差等缺点。

彩科生物高通量单细胞光导系统通过在自主研发的光导芯片微腔中操作和培养单B细胞,在芯片上直接完成单细胞抗体表达、抗原结合及功能测试,将抗体药物早期发现时间缩短了1.5个月,大大加快了抗体药物开发进程。

高通量单细胞光导系统LyTARS™操作流程

  • 1单个细胞导入

    系统软件自动识别单个细胞,并利用电场操控技术将它们一次性导入芯片微腔室。

  • 2目标细胞培养

    营养物质和细胞代谢物在芯片微腔室内外不断进行物质交换,软件会实时地对芯片微腔室进行成像记录,并多维度实时监测细胞状态。

  • 3在线On-Chip检测

    系统会定时记录每个微腔中单细胞状态,并定时检测分泌物的水平。单个微腔小于0.5 nL的体积使得细胞分泌物浓度可以轻松累积到可检测水平。

  • 4单细胞/克隆导出

    通过光电定位技术,可灵活选择目标细胞,并将目标细胞导出至96孔板中,方便后续实验操作。

抗体发现

  • 传统方法
     
    2-3个月
  • 高通量单细胞光导系统—LyTARS™
     
    2-3周

应用举例

抗体发现

1单细胞解离
2细胞导入
3功能检测
4细胞导出
5单细胞RT-PCR及VH/VL测序
6抗体表达纯化及亲和力检测
1.流道内微球结合筛选实验
2.流道内种属交叉筛选实验

拓展应用

单细胞多组学应用(形态学/行为、分泌组、蛋白组学、转录组)

  • 单克隆分选及成像
  • 细胞分泌物
  • 分泌组学检测
  • 蛋白组学识别
  • 转录组蛋白组捕获
目的细胞 细胞分泌物 包被捕获抗体的Beads 荧光二抗 带核酸修饰的抗体 细胞内mRNA表达膜蛋白的靶细胞

TCR-T 细胞功能筛选

表达TCR的T细胞 Target细胞细胞激活 T细胞分泌的因子 细胞因子检测

功能基因组学

 
 
 

多维度实时测定抗体表达 提高单细胞认知的分辨率

  • 细胞直径
  • 活细胞筛选
  • 多重筛选
  • lgG分泌
  • 表达量检测
  • 多种属结合
  • RT-PCR扩增
  • 抗体表达
  • ELISA测定
  • 亲和力测定

设备参数及配套试剂盒

仪器参数

设备尺寸

长1310 mm×宽895mm×高1689mm

导入规格

• 推荐导入的细胞密度:5E6~2E7 cells/mL

• 样本容器规格: 1.5mL EP管, 0.2mL PCR 管

荧光通道

• 4个常用荧光通道(DAPI、FITC、Cy3、Cy5)可拓展至5个

培养条件

• 彩科浆B细胞专用培养基/客户自定义培养基

• On-chip培养温度范围: 10°C - 40°C

导出规格

• 自动化导出

• 样本容器规格:  96孔半裙边PCR微孔板/ 96孔细胞培养板

• 微孔板温度控制4°C - 10°C

气体供应
(通培养基或细胞培养箱)

 

CO₂: 20-120psi

压力自动反馈

芯片参数

品名与规格

LyPartitionTM 14K芯片:14000个微腔;

LyPartionTM  6K芯片:6000个微腔

大小

50*50mm(流道区域:20*15mm)

芯片容量

有效单细胞捕获数>12000

样本进样量

5-20μL

1次上次样操作入孔单细胞率

50%

2次上次样操作入孔单细胞率

80%

小鼠单B细胞抗体筛选

产品名称 规格
LyPartition™ 14K芯片 1/5

小鼠浆B细胞发现试剂盒 (包含):

• 小鼠浆B细胞样本处理试剂盒

• 小鼠浆B细胞专用培养基

 

1/2
抗原偶联试剂盒 1 (10个反应)
小鼠浆B细胞重轻链扩增试剂盒 1/96个细胞

羊驼单B细胞抗体筛选(在研)

产品名称 规格
LyPartition™ 14K芯片 1/5

羊驼浆B细胞发现试剂盒 (包含):

• 羊驼浆B细胞样本处理试剂盒

• 羊驼重链扩增试剂盒

 

1/2
抗原偶联试剂盒 1 (10个反应)
羊驼重链扩增试剂盒 1/96个细胞

兔单B细胞抗体筛选(在研)

产品名称 规格
LyPartition™ 14K芯片 1/5

兔B细胞发现试剂盒 (包含):

• 兔B细胞样本处理试剂盒

• 兔记忆B细胞激活培养基

• 兔B细胞专用培养基

1/2
抗原偶联试剂盒 1 (10个反应)
兔B细胞重轻链扩增试剂盒 1/96个细胞

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